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Curso Teórico-Práctico de Cultivo de Células Humanas

Temas Teóricos

Dia 1
1. Introducción al cultivo celular. Tipos de cultivo monocapa y suspensión.
a. Cultivos de células adherentes.
b. Cultivos de células en suspensión.
c. Diferencias entre cultivos primarios de células y líneas contínuas.
d. Composición básica y tipos de medios de cultivo.
2. Aplicaciones del cultivo celular.
a. Cáncer
b. Virología
c. Ingeniería de proteínas
d. Regeneración de tejidos
e. Estudios de toxicidad de drogas
3. Microscopia en el análisis celular.
a. Campo claro
b. Campo oscuro
c. Contraste de fases
d. Barrido
e. Transmisión
f. Cofocal
4. Cuarto de cultivo.
a. Equipo de laboratorio
b. Reglas de seguridad
c. Método aséptico.

Dia 2
5. Medios de cultivo y condiciones de cultivo.
a. Superficies
b. pH
c. Suero fetal bovino
d. Vitaminas
e. Temperatura
f. Concentración de gases
6. Propagación celular
a. Pasajes,
b. Disgregación mecánica y enzimática.
7. Contaminaciones en el cultivo celular.
a. Bacterias
b. Hongos
c. Virus
d. Otras líneas celulares.
8. Criopersevación
9. Conteo celular
a. Técnicas de conteo celular
b. Equipos

Dia 3
10. Ensayos de viabilidad y propagación.
a. Ensayo de exclusión con azul tripano.
b. Retención de rojo neutro.
c. Cuantificación de ATP.
d. Etiquetado con calceína.
e. Inclusión de timidina (H3).
f. Ensayo colorimétrico con Sulforrodamina B.
g. Impedancia eléctrica célula-sustrato.
h. Ensayo clonogénico.
11. Ensayos de citotoxicidad
a. Liberación de lactato deshidrogenasa (LDH).
b. Conversión mitocondrial del MTT.
c. Reducción del Alamar Blue (Rezasurina).
d. Pérdida de (H3) 2-desoxy-D-glucosa.
e. Unión del Yoduro de propidio a ADNdc
12. Evaluación de apoptosis
a. Actividad de caspasa 3/7, 8, 9.
b. Tinción con naranja de acridina y bromuro de etidio.
c. Análisis TUNEL (Fragmentación del ADN).
d. Ensayo cometa (Fragmentación del ADN).
e. Ensayo de afinidad con Anexina V.
13. Ensayos funcionales para la determinación de metástasis y angiogénesis
a. Scratch assay (Wounding Healing assay).
b. Ensayo de cámara de Boyden (Migración celular).
c. Método de formación de tubo (Huvec cells).

Dia 4
14. Sistemas de transfección de líneas celulares
15. Citometría de flujo
16. Cultivos en 3D y aplicaciones

Prácticas de laboratorio.
1. Presentación del cuarto de cultivo
2. Observación de líneas celulares
3. Preparación de medios de cultivo
4. Descongelación
5. Pasaje
6. Conteo celular
7. Ensayo de viabilidad y citotoxicidad por MTT
8. Criopreservación.


Requisitos de ingreso

Cubrir el pago de inscripción.
Registrarse en: https://monitor.questionpro.com/cursocelulashumanas


Objetivo

Adquirir habilidades para llevar a cabo las técnicas básicas de propagación y criopreservación de líneas celulares, así como la determinación de la viabilidad y citotoxicidad mediante el método MTT


Categoría

Institucional

Tipo de actividad

Curso

Modalidad

Presencial

Dirigido a

Profesionales y estudiantes del area de la salud, Ciencias Biológicas, Naturales e Ingenierías. Médicos, Químicos, Biólogos, Farmacobiólogos, Veterinarios, Investigadores.

Cuota de inscripción

$9,700.00

Documento probatorio

Constancia

Horario

9am - 5pm

Duración

40

Cupo

10 máximo

Responsable: Coordinación de Educación Continua de la Facultad de Ciencias Biológicas